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足不出戶,帶您認識實驗室常用細胞

點擊次數:219   發布時間:2020/2/24 15:13:03

    實驗室常用細胞簡介,有助于了解基本的細胞信息,非常有用!
 
    一、CHO-K1細胞
    CHO-K1細胞是實驗中非常常用的一個細胞株,在生物制藥中使用也非常廣泛。該細胞株培養條件簡單,貼壁強度適中,比較容易轉染,很適合用它來研究一般哺乳動物基因的功能。

    來源:Cricetulus griseus (中國倉鼠) 卵巢 

    形態:表皮細胞 

    生長特性:貼壁

    注釋:CHO-K1由CHO衍生而來,CHO是T. T. Puck 在1957年從一只成年中國倉鼠卵巢獲得的。
    培養液:Ham's F12K (含2 mM L-谷氨酰胺,1.5 g/L NaHCO3), 10% 胎牛血清。

    傳代:吸去培養液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養箱內約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。(以1:4到1:8為宜,傳代期間培養液更換1-2次)

    凍存:95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

    二、293細胞
    293細胞比較容易轉染,是一個很常用的表達研究外源基因的細胞株。293細胞的一個衍生株:293T/17的轉染效率更高,成為廣大研究者研究基因功能的一個強大工具。

    293細胞的缺陷是生長過程中貼壁強度比較小。所以在實驗過程中容易流失,從而影響實驗結果。如果一個實驗室新得到的293細胞是郵寄得到的并且細胞在培養瓶中,就需要讓細胞沉降幾天時間,因為大量細胞會漂浮在培養液里。

    來源:人體腎臟

    形態:上皮細胞 

    生長特性:貼壁 

    注釋:該細胞含腺病毒5 DNA 。

    培養液: MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10% 馬血清(熱滅活)。

    傳代: 吸去培養液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養箱內約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。(以1:2到1:4為宜,傳代期間培養液2-3天更換1次)

    凍存:95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

    三、vero細胞
    Vero細胞被成功的用來培養狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗,在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻,在醫藥研究中廣泛應用。

    來源: 非洲綠猴腎細胞 

    形態:上皮細胞 

    生長特性:貼壁

    注釋:該細胞是日本千葉大學的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養出來的。
培養液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10%胎牛血清

    傳代:吸去培養液。用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養箱內約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。(以1:3至1:6為宜,傳代期間培養液每周更換2-3次)

    凍存: 95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

    四、NIH-3T3細胞
    NIH-3T3細胞在實驗室常用來做轉染及基因表達的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。

    來源: Mus musculus(小家鼠)胚胎 

    形態:成纖維細胞樣 

    生長特性:貼壁

    注釋:為得到適合轉染得細胞株,NIH-3T3細胞至少連續克隆過5次。NIH-3T3細胞容易轉染DNA,鼠痘病毒陰性。

    培養液:DMEM(含4mM L-谷氨酰胺、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氫鈉),10%小牛血清

    傳代:吸去培養液。(不要讓細胞長滿培養器皿,長滿80%為宜)用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養箱內約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。(以3-5x103/cm2為宜,傳代期間培養液每周更換2次)

    凍存: 95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。 

    上海恒遠是一家生產和銷售科學研發用試劑產品公司,領域涵蓋化學、分析化學、生命科學和材料科學等基礎創新領域,助力客戶的研究計劃,在廣大科研用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,以過硬的產品質量和好的服務態度,為客戶提供一個穩定平臺,成為客戶可信賴的長期合作伙伴。我司提供技術在線指導,有任何實驗問題,都可致電咨詢哦!

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